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相差显微镜计数血小板方法的建立和评价_图文

国际检验 医学杂志 2 0 1 3 年 9 月第 3 4 卷第 1 7期

I n t   J   L a b   Me d , S e p t e m b e r   2 0 1 3 , Vo 1 . 3 4 , N o . 1 7  

及 主动脉并产生炎 症[ 2 ] 。康金 锁等[  对 2 5 5例 梅 毒 血 清 阳性  患者进行 分析( 研 究 的 对 象 多 为 中老 年 人 或 自觉 无 任 何 梅 毒 相 
关症状者 ) , 在 T P P A 阳性 患 者 中 , 主 动 脉 疾 病 及 心 力 衰 竭 患 



定 关系 , 其 具 体 发 生 机 制 还 有 待 于进 一 步 考 证 。   从以上这些研究笔者发现尽管隐性梅毒患者的心功能 、 血 

脂、 血 糖 方 面 部 分 血 清 生 化 指 标 结 果 显 示 与 对 照 组 出现 差 异 ,   但 其 数值 基本 都 是 在 正 常 参 考 范 围 波 动 , 或 是 轻 度 增 高 或 降  低 。这 可 能是 因 为 隐性 期 时 , 梅 毒 螺 旋 体 隐 藏 在 组 织 或 淋 巴 系  统 内, 虽然临床上没有症状 , 但 心 血 管 系 统 还 是 会 出现 一 些 早 

病 率 显 著 升 高 。梅 毒 性 心 血 管 病 多 数 在 梅 毒 感 染 1 0 ~2 5年 后 
发病 , 一 旦 出现 症 状 多属 晚 期 , 并 发症 较 多 , 故 早 期 诊 断 尤 为 重 

要 。心 血 管梅 毒 的 患 病 率 与 梅 毒 的 早 期 及 时 治 疗 有 密 切 的 关  系, 如 果在 早 期 能及 时 治疗 , 梅 毒 性 心 血 管 病 的 患 病 率 仅 为  0 . 4   , 未 经 治 疗 或 是 治 疗 不 充 分 的梅 毒 患 者 患 病 率 高 , 尸 检 时  可有 7 5   ~8 5   的患者有心血 管病变 _ 4 ] 。 因 此 笔 者 对 隐 性 梅  毒 患 者 的 心功 能 、 血脂 、 血 糖 常 用 生化 指 标 进 行 了分 析 , 以 期 能  初 步 了解 隐性 梅 毒 患 者 这 些 生化 指标 的 特 点 , 提 高 临 床 医 生 对  隐 性 梅 毒 的重 视 。 已 有 大 量 实 验 数 据 表 明 , 螺 旋 体 对 主 动 脉 滋 

期 不 易被 察 觉 的 病 变 , 当 机 体 抵 抗 力 降 低 时 便 会 出 现 临 床 症 
状 。对 隐性 梅 毒 患 者 进 行 血 生 化 指 标 检 测 不 仅 反 映 了这 些 组  织 器 官 自身 的 健康 与 功 能状 态 , 而 且 往 往 还 预 示 了隐 性 梅 毒 患  者 相 关 并 发症 的发 生 、 发展及 预后 , 对 辅 助 临 床 对 该 类 病 患 的  诊 疗 及 判 断预 后 起 到 了 积 极 作 用 。应 该 注 意 的 是 在 临床 上 对  每 一 项 血 生 化 指标 的分 析都 不应 孤 立 地进 行 , 而 必 须 结 合 多 个  指 标 及 梅 毒 血 清学 试 验 甚 至 多种 辅 助 检查 结果 进行 综 合 评 价 ,   只有 这 样 才 能 正 确 把 握 该 项 指标 所 体 现 的 实 际 临床 意 义 , 更 科  学 地 反映 隐性 梅 毒 患者 的病 理 生 理状 态 , 及 时 准 确 地 制 定 出正  确 合 理 的诊 疗 策 略 。  
参 考 文 献 
[ 1 ] 孙 晓燕 , 刘波 , 党倩丽 , 等. 2 0 0 8 ~2 0 1 0年 住 院患 者 隐 性 梅 毒 的 调 

养血管更具偏 好 , 特 别 是 近 端 主 动 脉 。经 梅 毒 螺 旋 体 入 侵 后 ,  
主 动 脉 内膜 出 现 弥 漫 性 病 变 , 粥 样 硬 化 性 改 变 几 乎 波 及 受 累 主  动 脉 的整 个 内 膜 面 。粥 样 硬 化 斑 大 量 形 成 , 即 所谓“ 树 皮 剥 脱 
征” 。胆固醇 , 特别 是 L D L — C 是 形 成 动 脉 硬 化 的 主 要 物 质 ] ,  

临 床 测 定 TC、 TG、 HD L — C和 L D L — C 对 心 脏 事 件 的 危 险 评 估  是 非 常重 要 的 。经 过 两 组 结 果 比 对 可 以发 现 , 试 验组 的 T G、   T C、 L DI   一 C 的 异 常 率 及 结 果 范 围均 高 于 对 照 组 , 这 提 示 隐 性 梅  毒 患 者 体 内 可 能 已 经 出现 血 脂 代 谢 紊 乱 。  
通过 同时测定 心肌 酶谱 发 现 , 试验组的 C K、 AS T、   HB —   DH 异 常 率 与 对 照 组 也 存 在 显 著 的 统 计 学 意 义 。 这 与 罗 平  等  的报 道 非 常 相 似 , 他 们 发 现 老 年 梅 毒 患 者 心 肌标 志 物 异 常 

查与分析[ J ] . 中 国皮 肤 性 病 学 杂 志 , 2 0 1 2 , 2 6 ( 2 ) : 1 3 5 — 1 3 6 .  
E 2 ] 姚 民强 , 王兴 民 , 王 佩显. 梅 毒 性 心 血 管 病 早 期 诊 断 的 研 究 现 状  E J ] . 中 国心 血 管 杂 志 , 2 0 0 6 , 1 1 ( 1 ) : 7 4 — 7 6 .  

[ 3 ] 康金锁 , 王恺隽 , 刘哲 , 等. 心 血 管 疾 病 患 者 梅 毒 血 清 学 检 测 阳 性  结果分析E J ] . 中 国分 子 心 脏 病 学 杂 志 , 2 0 1 0 , 1 0 ( 5 ) : 2 6 I - 2 6 4 .  
[ 4 ] 张晓东 , 赵玉铭. 梅毒的诊断与治疗 [ M] . 北京 : 人 民军 医 出 版 社 ,  
2 0 0 5: 2 0 9 — 2 2 0 .  

以C K、 AS T较 为 常 见 , 其发 生率分别为 3 7 . 9  、 2 9 . 1   。而 众  所周知 , 这三个指标是在 心肌 损伤 时均会 有不 同程度 的升 高 ,   是 心 机 损 伤 的标 志 物 。此 结 果 提 示 在 隐 性 梅 毒 患 者 中 可 能 有 


E 5 ] 彭玉芳 , 汪 宏 良. 血 脂 及 载 脂 蛋 白检 测 在 心 血 管 病 中 的 应 用 进 展  E J ] . 国 际检 验 医学 杂 志 , 2 0 1 1 , 3 2 ( 5 ) : 5 9 2 — 5 9 4 .  

部 分 已 出现 心肌 损 伤 , 因心 血管有 较强 的代偿 机制 , 故 不 显 

示症状 , 只有当病变严重 , 妨碍血液循环 时才出现症状 , 引起 患 
者重视而就 医。另外 , 值 得 注 意 的是 , 试 验 组 的 GI   U 异 常 率 

[ 6 ] 罗平 , 刘志华 , 赵业萍. 老年梅 毒患者 心肌酶 、 c T n 一 1 及 C R P 检 测 
的意 义 [ J ] . 放射免疫学杂志 , 2 0 0 8 , 2 l ( 5 ) : 4 6 2 — 4 6 3 .  
( 收 稿 日期 : 2 0 1 3 — 0 6 — 1 5 )  

较正常组显著增 高( P一0 . o o o ) 。笔 者 推 测 隐 性 梅 毒 患 者 发 生  心 血 管 病 变 可 能 与 梅 毒 螺 旋 体 入 侵 导 致 机 体 糖 脂 代 谢 紊 乱 有 
?

检 验 技术 与方 法 ?  

、  

相 差显 微 镜 计 数 血小 板 方 法 的建 立 和评 价 
彭玉 莲 , 马  骥 , 吕 国全 , 马  艳 , 郑智 明 , 郑松 柏△  

( 广 东省 中 医院检 验 医学部 , 广 东广 州 5 1 0 1 2 0 )  
摘  要 : 目 的  建 立 和 评 价 相 差 显 微 镜 血 小板 ( P L T ) 计 数 法 。方 法  用 相 差 显 微 镜 法 ( 许 汝和法 : P L T稀释液 0 . 3 8   mL加 2 O  
L血液 , 混 匀, 充池 , 镜 检计数) 计 数 3次 取 平 均 值 。 同 时 , 将其 计数 的 8 4例 P I   T与 电阻抗 法、 光 散 射 法 的 检 测 结 果 进 行 比较 。  

结 果  相 差 显 微 镜 手 工 计数 法 计 数 P L T 高值 ( 8 9 5 ×1 0 。 / i   ) 、 中值 ( 2 3 3 ×1 0 。 / L ) 、 低值 ( 1 0 ×1 0 。 / L ) 标 本 的 变 异 系数 ( C V ) 分 别为  

2 . 9   , o 4、 2 . 7  、 1 4 . 8   。P L T在 4 0 ×1 O 。 / I   ~8 2 8 ×1 0   / L 范 围 内线性 良好 ( r 一0 . 9 9 9   3 ) 。P L T 计 数 在 标 本 采 集后 4 . 5   h 内稳 定 。  
与 电 阻抗 法 、 光散 射 法 计 数 PL T 的 比较 : 当 i 0 0×i 0 。 / L< PL T≤ 3 0 0×1 0   / L 时其 他 两种 方 法 测 定 结 果 与相 差 显微 镜 计 数 法 计 数 

的结果比较差异无统计 学意义( P >O . 0 5 ) 。而 P I   T< 1 0 0 ×1 0 。 / L或 P L T >3 o o ×l O 。 / I   时, 其 他 两种 方 法 测 定 结果 与相 差显 微 镜  计 数 法计 数 的 结 果 比较 差异 有 统 计 学 意 义 ( P< 0 . 0 5 ) 。结论 为P L T 异 常 时进 行 复 核 的 可 靠 方 法 。  
关键词 : 血 小板 计 数 ;   相 差 显微 镜 ;   自动 分 析 ;   方 法 建 立 和 评 价 

相 差 显 微 镜 手 工 计 数 法特 异 、 准确、 精 密、 线性 和稳定性较好 , 是 作 

D O I : 1 0 . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 6 7 3   4 1 3 0 . 2 0 1 3 . 1 7 . 0 4 0  

文 献 标 识码 : A  

文章编号 : 1 6 7 3 — 4 1 3 0 ( 2 0 1 3 ) 1 7 — 2 2 9 5 — 0 3  

目前 , 大 部 分 地 区 已经 引进 了 全 自动 血 液 分 析 仪 用 来 替 代  手工操 作方法 , 全 自动 血 液 分 析 仪 具 有 效 率 高 、 重复性好 、 检 测 

结果准确性高等优点 , 可 以 避 免 手 工 操 作 时 由于 操 作 人 员 操 作 
水 平 和 习 惯 不 同对 结 果 造 成 的误 差 。但 大 部 分 学 者 认 为 , 在 血 

基金项 目: 广 东 省 医学 科 研 基 金 课 题 ( A2 o 1 o 2 1 6 ) ; 广 东 省 中 医 院 朝 阳人 才 专 项 ( 2 0 1 3 KT1 0 6 5 ) 。  
s i na . c o m。  

通 讯作者 , E - ma i l : s o n g b a i z h e n g @ 

?  

2 2 9 6  ?  

国际检验 医学杂 志 2 0 1 3年 9 月第 3 4 卷第 1 7期  I n t   J   L a b   Me d , S e p t e mb e r   2 0 1 3 , Vo 1 . 3 4 , No . 1 7  

液分析中 二 三 分 类 的 血 液 分 析 仪 或 者 是 更 高 档 次 的 五 分 类 血 液  分 析 仪 都 不 能 取 代 一 个 熟 练 的 检 验 科 技 术 人 员 的手 工 操 作 _ 1 ] ,   因为血小板( P I   T) 容易黏附 、 聚集 、 破碎 , 而 且 计 数 时 容 易 受 到  小红细胞 、 红细胞碎 片、 非P 1   T颗粒( 简 称 NP P s ) 等 的影 响 , 血  细 胞 分 析 仪 因 不 能 识别 这 些 异 常 颗 粒 而 导 致 计 数 结 果 不 准 确 ,  
出现 P I   T 计 数 结 果 假 性 减 低 或 假 性 增 高 。相 差 显 微 镜 计 数 能 

而 P L T %1 0 0 ×1 0 。 / L或 P L T ̄ 3 0 0 ×1 0 。 / I   时 , 其 他 2种 方 法  测定 结 果 与 相 差 显 微 镜 计 数 法 计 数 的 结 果 比较 差 异 有 统 计 学  意义( P< O . 0 5 )。见 表 2 ~ 4。   表 2   低 值 组 3种 方 法 对 比 计 数 结 果 的 比较 ( ×1 O   / I   )  

清楚的将 P I   T与其他非 P I   T 的 各 种 干 扰 成 份 区分 开 来 , 保 证 
P I   T 计 数 的 准确 性  。 因 此研 究 者 建 立 该 计 数 法 并 对 其 进 行 

了评 价 , 同 时将 该 方 法 与 其 他 两 种 P I   T 计 数 方 法 —— 电 阻抗  法、 光散 射 法 的结 果 进 行 比较 。  
1 资 料 与 方 法 
无 数据。  

1 . 1 一 般 资料

收集 门诊 、 住 院患 者 和 健 康 体 检 者 新 鲜 血 标 

表 3  

中 值 组 3种 方 法 对 比计 数 结 果 的 比较 ( ×1 0 。 / L )  

本共 8 4 例, 该标本为真空采 血管 ( 购 自广 州 阳普 公 司 ) 采 集 的 
静脉血 . 由 E D T A— K  抗 凝 , 室 温 下 放 置 。根 据 S y s me x   1 0 0 0 i  

( 简称 X S - 1 0 0 0 i )的 检 测 结 果 , 将 P L T分 为: 低 值组 ( 1×  
l O   / I   ~9 9 ×1 O   / I   ) 2 0例 , 中值 组 ( 1 0 0 ×1 0   / i   ~3 0 0×1 0 。 / I   )  

3 3例 . 高值 组 ( 、 ' 、 ' 3 0 0 ×1 0 。 / I   ) 3 l例 共 3组 。 每 例 标 本 均 作 涂  片染色 . 在显微镜下 观察有 没有 巨大 P I   T、 细胞 碎片 、 P L T 聚 
集等异常情况。  
无数据 。  

1 . 2   皿细胞 计数仪 计数 P I   T

计数 P I   T时, X S 一 1 0 0 0 i 血 液 

表 4  

高值组 3 种 方法 对 比计 数 结 果 的 比 较 ( ×1 O 。 / L)  

分析仪采用电阻抗法 , 以 及 其 原 装 配 套 的试 剂 、 校 准 品 和 质 控  全血 , 温度 1 5 一 , 3 0。 c。 A D VI A 一 2 1   2 O血 细 胞 分 析 仪 采 用 的 是  二维 激 光 法 , 其 原 装 配 套 的试 剂 、 校准品和质控全血 , 运 行 环 境  为温度 1   5 ~3 0℃, 相对湿 度 4 5   ~8 5  , 仪 器 法 计 数 3次 , 取  其汁数结果平均数 。   1 . 3 相 差 显 微 镜 计 数 法 ‘ 数 P I   T 按《 全 国 临 床 检 验 操 作 规  程》 第 3版  操 作 。用 E D TA — K 2抗 凝 , 取2 O“ L全血 , 加 入 到 
0 . 3 8   mI   草酸铵稀释液( 草酸铵 1 0   g / L   E D T A— Na 2   0 . 1 2   g / L )  


无数据 。  
讨  论 

准确计数外周血 的 P L T, 是 目前 血 液 学 和 检 验 医 学 界 的  热门话题 , 但要 准确 计数 P L T实非 易事 _ 4   ] 。 目前 P L T 计 数  方法 主要 有 手 工 计 数法 、 电阻抗 法 和 光 散射 法 , 还有 P L T/  

中, 振荡混 匀, 静置 1 5   mi n , 混 匀再充人 牛鲍式计 数板 , 在 湿 盒 
中静置 2 0   mi n后 在 相 差 显 微 镜 下 计 数 P L T。所 用加 样 器 均 经 

过 校 准 。所 有 标 本 在 2   h内计 数 完 毕 。  
1 . 4 统 计 学 处理 利用 S P S S   S t a t i s t i c s   1 7 . 0对 结果 进行 统计   分忻 。以 P <0 . 0 5为 差 异有 统计 学 意 义 。  
2 结  果 

R B C 比值 法 ] 。尽 管 血 细胞 分 析仪 在 原 理 和 技 术 上 已经 有 了   很大的进步 , 但在许 多临床实验室 , P L T计 数 结 果 仍 然 难 以令 
人 满 意 。这 是 因为 P I   T 计 数 的干 扰 因 素 较 多 , 如E D TA 依 赖  性P L T假性减少 、 细胞 碎 片 、 颗粒 杂质 、 P I   T 聚 集 和 黏 附 等 都 
可 对 计 数 结 果 产 生 较 大 干 扰 。如 何 选 择 一 种 准 确 、 快 速 和 实 用  的P L T计数方法 , 是 当 今 急 需 解 决 的 问 题 。 因 此 本 文 的 目的  就是建立一种能够准确计数 、 经济实惠 、 易 于普 及 的 P L T 计 数  方 法 并 且 可 以作 为 评 价 其 他 P L T计 数 方 法 的标 准 。  

2 . 1   稳定性

取 一份 新 鲜 血 标 本 , 在 不 同 放 置 时 问 内分 别 用 

相 茂  微 镜 计 数 P I   T。 结 果 见表 1 。结 果 显 示 标 本 在 4 . 5   h内  
测 定 结 果稳 定 , CV=4 . O 7   。  

表 1  
放置时问( 1 1 )
PI   T (× 1 0。 / I   )  

不同放置时间 内 P I   T 计 数 结 果 
0   1 . 0  1 . 5  2 . 0  2 . 5  3 . 0  3 . 5  4 . 0  4 . 5  
l   6 2   1 5 8   1 6 7   1 6 0   l 4 7   1 7 0   1 6 5   1 5 6   1 6 0  

本文通过实验分析显示 相差 显微镜 法 在 4 . 5   h内计 数 结  果稳定 , 线 性 良好 , 精 密度 较 好 。当血 1 0 0 ×1 0 。 / L <P L T≤  3 0 0 ×1 0 。 / L时 , 3种 方 法 计 数 结 果 比 较 差 异 无 统 计 学 意 义 

2 . 2 线性分析

以 一高 值 标 本 ( 8 2 8 ×1 0 。 / i   )用 草 酸 铵 稀 释 

( P >O . 0 5 ) , 而 P L T  ̄3 0 0 ×1 0 。 / i   时 3 种 方 法 结 果 比 较 差 异 有 

液 作 系列 稀 释 : 1 ( ) O   、 8 O   、 4 O   、 2 O   、 1 0   . 0 4、 5   , 相 差 显 微 镜 

统计学意 义( P %0 . 0 1 ) , 仪 器 法 计 数 结 果 明显 高 于 相 差 显 微 镜  手工法 , 其 原 因 主 要 是 小 红 细 胞 和 红 细 胞 碎 片 的 干扰 导致 仪 器 

手 工 计 数法 汁数 P I   T 各 3次 , 取 平 均 值 。结 果 显 示 相 差 显 微  镜 手 工 计数 结 果 在 4 O ×1 O   / I   ~8 2 8 x   1 0 。 / i   范 围 内线 性 良好 ,  
与 期望 值 具 有较 高 的 相 关 性 ( r 一0 . 9 9 7   5 ) 。  

法 计 数 结 果 偏 高  ] 。红 细 胞 碎 片 的干 扰 常 出现 在 体 内有 溶 血 
的患者 中, 比如 地 中 海 贫 血 , 由于 反 复 溶 血 刺 激 骨 髓 释放 不 成  熟红细胞 , 产 生 的红 细 胞 碎 片 和 有 核 红 细 胞 干 扰 P L T 和 白细  胞的检测 , 使 P L T 和 白 细胞 的检 测结 果假 性 增 高 , 这 种 现 象 可  以采取手工 计数 P L T 加 以矫 正 。而 P L T ≤1 0 0 ×1 0   / L 时 仪  器法计数结果低 于相 差显 微镜手 工法 , 主要 原 因 是 E D T A 依  赖性 P L T假 性 减少 导 致计 数 结 果偏 低_ s ] , P L T 发 生 黏 附 聚  集, 体 积 增 大 超 过 了仪 器 对 P I   T 计 数 阈值 设 定 的 范 围 , 使 血 细 

2 . 3 不精密度

取高值 ( 8 9 5 ×1 0   / L ) 、 中值 ( 2 3 3 ×1 0 。 / I   ) 、 低 

值( 1 0 ×1   0   / I   ) 标本 各一份 , 每份标 本连续 重复 测定 l O次 , 结 
果  示 C V分 别 为 2 . 9   、 2 . 7   、 1 4 . 8   。   2 . 4 各种 P I   T 计数 方 法 结 果 比较  当 P L T在 1 0 0 ×1 0   / L <  P I   T ≤3 0 0 ×1 0   / I   范 围 内时 其 他 2 种 方 法 测 定 结 果 与 相 差 显  微镜计数 液 {   】 数 的 结 果 比 较  肄 尢 统 汁学 意 义 ( P> 0 . 0 5 ) 。  

国际检验 医学 杂志 2 0 1 3 年 9月 第 3 4 卷第 1 7 期

I m  J   L a b   Me d , S e p t e mb e r   2 0 1 3 , V o 1 . 3 4 , N o . 1 7  

胞计数仪无法 识别而不 被计 数 , 导致 P L T 假 性 减 少 。这 种 情 
况 需 要 人 工计 数 P L T 来 进 行 校 正处 理 , 或者使 用枸橼酸 盐 、 草  酸盐抗凝 血液 、 E D TA 抗 凝 血 中加 入 丁胺 卡 那 霉 素 l 4 ] 的办 法 来  获得最准 确的 P L T数值 。另外大 P L T 的 干 扰 和小 P L T 的干  扰 也 会 导 致 仪 器 法 计 数 结 果 偏 低 。相 差 显 微 镜 是 利 用 相 差 板  的光 栅 作用 引 起 位相 差 异 , 并 显示 出光强 度 的 明 暗对 比, 使  P L T在 暗视 野 中 易于 识别 , 从 而能 清 楚 的将 P L T 与 其 他 非  P L T的各种干扰成 份明显地 区分开来 , 保证 P L T 计 数 的 准 确 
性  。  

5 2 7 .  

[ 3 ] 叶应 妩 , 王 毓三 , 申子 瑜 , 等. 全 国临 床 检 验 操 作 规 程 [ M] . 3版 . 南 
京: 东南 大学 出版 社 , 2 0 0 6 : 1 3 6 — 1 3 7 .  
r 4 ] Ku n z   D.P o s s i b i l i t i e s   a n d   l i mi t a t i o n s   o f   a u t o ma t e d   p l a t e l e t   c o un t —  

i n g   p r o c e d u r e s   i n   t h e   t h r o mb o c y t o p e n i c   r a n g e [ J ] . S e mi n   Th r o mb  
He mo s t , 2 0 0 1, 2 7 ( 3 ): 2 2 9 — 2 3 5 .  

[ 5 ] 刘非 , 杨红玲 , 梁绮华 , 等. 红 细 胞 体 积 分 布 宽 度 引起 光 学 法 和 电 
阻抗 法 血 小 板 计 数 的 差 异 分 析 [ J ] . 国际检验 医学杂 志, 2 0 1 2 , 3 3  
( 1 4) : 1 7 5 O   1 7 5 2 .  

[ 6 ] Au l t   KA. P l a t e l e t   c o u n t i n g : i s   t h e r e   r o o m  f o r   i mp r o v e me n t ?[ J ] .  
La b   He ma t o l , 1 9 9 6, 2 ( 1 ): 1 3 9 — 1 4 3 .  

总之 , 相差显微镜计 数法 计数 P L T 具有 准确 性 、 精密 度 、   线性和稳定性 好 , 方 法 简单 实 用 、 经 济实惠 , 适 合 各 种 大 小 医 院  的 普 及 等 优 点 。同 时 , 与其他 P L T 自动 分 析 法 检 测 结 果 间 有  良好 的一 致 性 , 不 失 为 一 种 可 以 在 临 床 实 验 室建 立 的 准 确 计 数  P L T的可靠方法并用 于评价其他 P L T计数方法 。  
参 考 文 献 
[ 1 ] Ha r r i s o n   P, Au l t   KA, C h a p ma n   S , e t   a 1 . An   i n t e r l a b 0 r a t o r y   s t u d y  
o f   a   c a n d i d a t e   r e f e r e n c e   me t h o d   f o r   p l a t e l e t   c o u n t i n g [ J ] . Am  J  
Cl i n   Pa t h o l , 2 0 01 , 1 1 5( 3) : 4 48 — 4 5 9 .  

[ 7 ] 梁瑞 莲 , 周远青 , 唐跃 华 , 等. 小 红 细 胞 对 不 同 原 理 血 液 分 析 仪 的 
血小 板 计 数 的影 响 [ J ] . 国 际检 验 医学 杂 志 , 2 0 0 9 , 3 0 ( 7 ) : 6 9 8   6 9 9 .  

[ 8 ] 吴辉. 血 标 本 放 置 时 间 对 白细 胞 及 血 小 板 计 数 的 影 响 [ J ] . 国 际检 
验 医学 杂 志 , 2 0 1 1 , 3 2 ( 1 8 ) : 2 1 4 8 — 2 1 4 9 .  

[ 9 ] 谢秀萍 , 张志 , 胡春梅. 6例 血 小 板 计 数 假 性 减 少 结 果 分 析 [ J ] . 国  际检 验 医学 杂 志 , 2 0 0 6 , 2 7 ( 6 ) : 5 6 5 — 5 6 6 .  

[ 1 0 ]巫 小 莉 , 周小棉 , 邓穗德 , 等. E DT A 抗 凝 剂 依 赖 性 假 性 血 小 板 减  少症血小板计 数 的研 究 [ J ] . 实 用 医学 杂 志 , 2 0 0 7 , 2 3( 4 ) : 5 7 8 —  
5 8 0 .  

[ 2 ] 巩惠芸 , 顾 晓菁 . 相 差 显 微 镜 血 小板 计 数 法 对 血 液 分 析 仪 测 定 “ 血 
小板计数减少” 结 果 的复 核 作 用 [ J ] . 检验 医学 , 2 0 0 4 , 2 2 ( 6 ) : 5 2 4  
?

( 收 稿 日期 : 2 0 1 3 - 0 5 — 2 8 )  

检 验 技术 与方 法 ?  

呼 吸道 非典 型 病 原 体 抗体 实验 室检 测 及病 原 分 析 
单咏 梅 , 周  宏 , 杨 凡, 万海 英  ( 上 海 同济 大 学附属 同济 医院检验 科 , 上海 2 0 0 0 6 5 )  
摘  要 : 目的  了 解 9种 非 典 型 呼 吸 道 病 原 体 抗 体 的 检 测 对 呼 吸 道 感 染 疾 病 的 诊 疗 价 值 。 方 法  采 用 间 接 免 疫 荧 光 法  ( I F A) , 检 测 肺 炎 支原 体 ( MP ) 、 肺炎衣原体 ( C P ) 、 嗜肺 军团茵( L P ) 、 Q 热 立克 次体 ( C B ) 、 腺病毒 ( AD V) 、 呼吸道合 胞病毒 ( R S V) 、  

甲型 流 感 病 毒 ( i n f l u e n z a   A  v i r u s ) 、 乙型 流 感 病 毒 ( i n f l u e n z a   B   v i r u s ) 、 副流 感 病 毒 ( HP I Vs ) 等 9种 呼 吸 道 病 原 体 I g M 抗体 , 分 析 其 
在 呼 吸 道 感 染性 疾 病 中的 检 出情 况及 临床 意 义 。结 果 2   9 9 0例 呼 吸道 感 染 患 者 , 9种 常 见 非 典 型 病 原 体 抗 体 ( I g M) 均 有 阳 性 检  出, 总 阳性 率 为 2 9 . 6 7  ( 8 8 7 / 2   2 9 0 ) ; 其 中 以肺 炎 支原体 、 乙型流 感病 毒 、 嗜 肺 军 团菌感 染 最为 常见 , I g M 抗 体 阳性 率 分 别 为  

1 3 . 7  、 4 . 6   , 0 4 和4 . 4   ; 嗜肺 军 团茵 好 发 于夏 秋 季 , 第3 、 4季 度 I g M 抗 体 阳性 率 分 别 为 6 . 3   , 0 4 、 6 . 9   ; 肺 炎 支原 体 感 染 未 见 明显 季  节性 变 化 ; 呼 吸道 合 胞 病 毒 感 染 率 最 高 为 第 1季 度 , I g M 抗 体 检 出 阳性 率 为 4 . 2  ; 乙型 流 感 病 毒 感 染 以 第 4季 度 高 发 , 阳 性 率 为 
9 . 1   ; 成人 与 儿 童 患者 均 以 肺 炎 支 原 体 、 乙型 流 感 病 毒 、 嗜肺 军 团菌检 出率较 高, 儿童 患 者 阳性 率 分别 为 1 0 . 7  、 1 O . 3   和 

5 . 6  ; 成 人 患者 阳性 率 分 别 为 1 5 . 0  、 2 . 2  和 4 . 0  ; 其 中 乙型 流 感病 毒 感 染 率较 成 人 显 著 增 高 ( Y   一9 . 5 6 , P <0 . 0 1 ) , 其 余 非典 
型病原体 I g M 检 出阳 性 率 较 低 , 且 成 人 与 儿 童 阳 性 率 差 别 不 大 。结 论  呼 吸 道 感 染 的 病 原 体 复 杂 多 样 , 应 该 使 用 不 同 的诊 断 方 
法同时检测 , 以 获 得 最 佳 的诊 断 结 果 。 采 用 间接 免 疫 荧光 法 ( I F A) 同 时检 测 9种 非 典 型 呼吸 道 病 原 体 I g M 抗体 , 简便 、 快速 、 适 合  于 常规 临 床 诊 疗 要 求 , 具 有 重要 临床 意 义 。   关 键词 : 呼吸道病原体 ;   I g M;   肺 炎支原体 ;   嗜肺 军 团菌  D o I : 1 O . 3 9 6 9 / j . i s s n . 1 6 7 3 — 4 1 3 0 . 2 0 1 3 . 1 7 . 0 4 1   文献标识码 : A  文章编号 : 1 6 7 3 — 4 1 3 O ( 2 O 1 3 ) 1 7 — 2 2 9 7 — 0 3  

呼 吸道 感 染 分 为 上 呼 吸道 感 染 和 下 呼 吸 道 感 染 , 上 呼 吸道  感染常见病 因为病毒 , 少数 由细菌 引起 ; 下 呼 吸 道 感 染 是 最 常  见 的感染 性疾 病 , 包括 急 性气管 支气 管炎 、 慢性 支气 管炎 、 肺 

炎衣 原 体 ( C P n ) 、 嗜肺 军团 菌( L p ) 、 及 Q 热 立 克 次 体 等_ 1 ] 。这 
些 非 典 型 呼 吸 道病 原 体 因 其 临 床 的 非 特 异 性 症 状 , 大 部 分 依 靠 

实验 室检 查 方 法 , 而 检 查 方 法 多 种 多 样 。然 而 这 些 病 原 体 的共  同特 点 是 分 离 培养 困 难 , 因而 缺 乏 所 谓 的 诊 断 “ 金标 准” 。为 了   解 本 院呼 吸 道感 染 患 者 中 非 典 型 病 原 体 的感 染 状 况 , 研 究 者 对 
2 0 1 2年 1 ~1 2月全 年 2   9 9 0例 吸道 感 染 患 者 进 行 非 典 型 病 原 体 

炎、 支气 管 扩 张 等 , 由病 毒 、 细菌 、 支原 体 、 衣 原体 、 军 团 菌 等 微 
生物 引起 , 其 防治应 遵循 预防为 主 、 准确 诊 断、 及 时 治 疗 的 原 

则, 治 疗 时必 须 明 确 引 起 感 染 的 病 原 体 以 选 择 有 效 的 抗 生 素 。  
非 典 型 病 原 体 的感 染 , 主 要 是 指 肺 炎 链 球 菌 等 常见 细 菌 以 外 的 

( MP 、 C P n 、 L p 、 Q 热立 克 次 体 、 腺病毒 、 呼吸道合胞病毒 、 甲 型 流 
感病毒、 乙型 流感 病 毒 、 副 流 感 病毒 ) I g M 检测 , 现 报 道如 下 。  
1 资 料 与 方 法 

病 毒、 衣原体 、 支 原 体 等 病 原 体 引 起 的感 染 , 明确 病原体 、 早 期  诊断 、 合 理 用 药 是 治疗 非 典 型 病 原 体 的感 染 的 关 键 。 已报 道 的  非典型 呼吸道病原体有很 多 , 最 常 见 的有 肺 炎 支 原 体 ( MP ) 、 肺 

1 . 1 一 般资 料

选 自 同 济 大 学 附 属 同济 医 院 2 0 1 2年 1 ~1 2  




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